Học sinh lớp 6-3 đang sống trong sự hòa bình và thói quen quen thuộc với giáo viên cũ. Thế nhưng, khi một cô giáo mới với gương mặt lạnh lùng và đôi mắt sắc bén xuất hiện, lớp học như bừng lên một cơn bão giông. Cô giáo này không chỉ nghiêm khắc trong việc dạy học mà còn cai quản lớp học như một nữ hoàng đích thực, hên biết rõ điểm nghịch của từng học sinh, lập bí quyết riêng để kiểm soát và kìm chế ý chí bất cần của những đứa trẻ. Sự thay đổi đột ngột khiến các em học sinh vô cùng lo lắng và bất lực. Là người mơ ước được chốn học hành trong sự vui vẻ và thoải mái, sẽ thế nào khi phải đối mặt với một nữ hoàng tương kế tương vàng trong lớp học? Liệu có bất kỳ ai đủ dũng cảm để xung phong về mặt đối diện với cô giáo mới? hay mọi chuyện sẽ diễn biến như cô giáo kỳ vọng, lớp học trở thành một nơi nghiêm ngặt và quân đội hóa.

“Nữ hoàng Lớp học” là một câu chuyện hài hước, mang đến cho người xem những cung bậc cảm xúc, từ sự sợ hãi ban đầu cho đến tiếng cười sảng khoái khi chứng kiến những trò nghịch ngợm và những sự tình bỡ ngỡ mà nam nữ sinh mang lại.